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常用于标记双链DNA3′端的酶是
A.Klenow片段
B.DNA连接酶
C.碱性磷酸酶
D.末端转移酶
E.限制性核酸内切酶
答案:A
分析:①原核生物DNA-polI是分子量109kD的单肽链,可被特异的蛋白酶水解为两个片段,即含323个氨基酸残基的小片段和含604个氨基酸残基的大片段(称Klenow片段)。Klenow片段具有5′→3′聚合活性和3′→5′核酸外切酶活性,而无5′→3′核酸外切酶活性。在DNA重组技术中,Klenow片段作为DNA聚合酶,常用于cDNA第二条链的合成和标记双链DNA3′末端。②DNA连接酶可催化DNA中相邻的5′-磷酸基和3′-羟基末端之间形成磷酸二酯键,使DNA切口封闭或使两个DNA片段连接。碱性磷酸酶的功能是切除DNA末端磷酸基。末端转移酶的功能是在3′-羟基末端进行同质多聚物加尾。限制性核酸内切酶的功能是识别特异序列,切割双链DNA。
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